食品微生物学检验
金黄色葡萄球菌检验
GB 4789.10-2010

目 录
?金黄色葡萄球菌的卫生学意义
??金黄色葡萄球菌的生物学特性
??2010版国标的主要修订内容
??金黄色葡萄球菌的检测方法
?? 金黄色葡萄球菌作为人和动物的常见病原菌，其主要存在于人
和动物的鼻腔、咽喉、头发上，50%以上健康人的皮肤上都有金
黄色葡萄球菌存在。因而，食品受其污染的机会很多。
?? 金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，可引起局
部化脓感染，也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等，甚至败
血症、脓毒症等全身感染。
?? 金黄色葡萄球菌的致病力强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭
性酶：溶血毒素、杀白细胞素、血浆凝固酶、脱氧核糖核酸酶
和肠毒素。
金黄色葡萄球菌的卫生学意义
??革兰氏阳性球菌，直径为
0.5～1.0微米，镜检时呈
单个、成对、四联或不规
则的簇群，如串状葡萄，
故称为葡萄球菌。
??金黄色葡萄球菌无芽胞、
无鞭毛，大多数无荚膜。　
金黄色葡萄球菌的生物学特性

?? 金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养基上生长
良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度37℃，最适生
长pH7.4。
?? 普通营养琼脂平板上形成湿润、光滑、有光泽、圆形
凸起的菌落，直径1-2mm。在培养初期呈灰白色，2-3
天后，可呈现金黄色，也可能有白色、黄色或桔色菌
落。
?? 大多数菌株产生类胡罗卜素，
使细胞团呈现出深橙色到浅黄色，
色素的产生取决于生长的条件，
而且在单个菌株中可能也有变化。
金黄色葡萄球菌的生物学特性
2010版与2008版的区别
2010版主要修改如下：
?? 合并了GB/T 4789.10-2008和GB/T 4789.37-2008的内容。
?? 修改了标准的中英文名称和适用范围。
?? 完善了计算公式二及系数1.1的解释。
?? 修改了附录A中胰酪胨大豆肉汤的名称，规范为10%氯化钠
胰酪胨大豆肉汤。
?? 删除了"第三法 金黄色葡萄球菌PetrifilmTM 测试片法"。
定量方法
定性方法
MPN法
平板计数法
增菌培养法
?? 适用于金黄色葡萄球菌含量较低而杂菌含量
较高的食品中金黄色葡萄球菌的计数。
?? 适用于金黄色葡萄球菌含量较高的食品中金黄
色葡萄球菌的计数。
?? 适用于食品中金黄色葡萄球菌的定性检验。
2010版GB检测方法及适用范围
GB 4789.10-2010 定性检测
样品处理：
?? 25g样品+225mL 7.5%氯化钠肉汤或10%氯化钠胰
酪胨大豆肉汤，于无菌均质杯或均质袋中，均质混匀。
?? 36±1℃培养18-24h。
GB 4789.10-2010 定性检测

?? 将上述培养物，分别划线接种到Baird-Parker平板和
血平板，血平板36±1℃培养18-24h。Baird-Parker平
板36±1℃培养18-24h或45-48h。
?? 将Baird-Parker平板和血平板上的典型菌落进行革兰
氏染色镜检及血浆凝固酶试验。
GB 4789.10-2010 定性检测

GB 4789.10-2010 定性检测
?? Baird-Parker平板：金黄色葡萄球菌圆形突起、光滑、湿润，颜
色呈灰色到黑色，边缘淡色，周围为一浑浊带，在其外层有一透
明圈。用接种针接触菌落似有奶油树胶的硬度。

?? 血平板：金黄色葡萄球菌呈金黄色，有时也为白色，大而突
起、圆形、不透明、表面光滑，周围有溶血圈。
GB 4789.10-2010 定性检测

?? 取新鲜配置的兔血浆0.5mL，放入小试管中，再加入
BHI培养物0.2mL-0.3mL，振荡摇匀，置36±1℃温箱
或水浴箱内，每半小时观察一次，观察6h，如呈现
凝固（即将试管倾斜或倒置时，呈现凝块）或凝固
体积大于原体积的一半，被判定为阳性结果。
?? 同时以已知血浆凝固酶试验阳性和阴性葡萄球菌菌
株的肉汤培养物作为对照。
?? 结果如可疑，挑取营养琼脂
?? 小斜面的菌落到5mL BHI，
?? 36±1℃培养18-48h，
?? 重复前面的凝固酶试验。
结果判定—血浆凝固酶试验

GB 4789.10-2010 平板计数法

样品处理：
?? 25g样品+225mL 磷酸盐缓冲液或生理盐水，
于无菌均质杯或均质袋中，均质混匀。
?? 十倍梯度稀释
GB 4789.10-2010 平板计数法

样品接种及计算：
?? 根据对样品污染状况的估计，选择2-3个适宜稀释度
的样品匀液，每个稀释度分别吸取1mL样品匀液以
0.3mL、0.3mL和0.4mL接种量分别加入三块Baird-
Parker平板，涂布均匀。
?? 36±1℃培养45-48h。
?? 将典型菌落进行确认实验，并计算结果。
GB 4789.10-2010 平板计数法

?? 如果只有一个稀释度平板的菌落数在20cfu-
200cfu之间且有典型菌落，计数该稀释度平
板上的典型菌落。
?? 最低稀释度平板的菌落小于20cfu，计数该稀
释度平板上的典型菌落。
?? 某一倍稀释度平板的菌落大于200cfu且有典
型菌落，但上一倍稀释度平板上没有典型菌
落，计数该级稀释度平板上的典型菌落。
平板计数法—计算说明

?? 某一倍稀释度平板的菌落大于200cfu且有典型
菌落，且上一倍稀释度平板上有典型菌落，其
平板上的菌落数不在20cfu-200cfu之间，计数
该级稀释度平板上的典型菌落，按公式①计算。
平板计数法—计算说明

举例1：
公式一：T=AB/Cd
菌落数65（4/5） 6 T=65×4×10÷5=520
稀释度10-1 10-2
平板计数法—计算说明

?? 两个连续稀释度的平板菌落数均在20cfu-
200cfu之间，按公式②计算：
平板计数法—计算说明

举例：
公式二：
T=(183×3÷5+21×4÷5)/1.1×0.1
=(110+17)×10/1.1
=1200
稀释度10-1 10-2
菌落数183(3/5) 21(4/5)
平板计数法—计算说明

GB 4789.10-2010 MPN法

样品处理：
?? 25g样品+225mL 磷酸盐缓冲液或生理盐水，
于无菌均质杯或均质袋中，均质混匀。
?? 十倍梯度稀释
GB 4789.10-2010 MPN法

样品接种：
?? 根据对样品污染状况的估计，选择2-3个适宜
稀释度的样品匀液，每个稀释度分别吸取1mL
样品匀液接种到10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤
管，每个稀释度接种3管。
?? 36±1℃培养45-48h。
GB 4789.10-2010 MPN法

菌落确认：
?? 用接种环从有细菌生长的各管中，移取一环
分别接种Baird-Parker平板，36±1℃培养
45-48h。
?? Baird-Parker平板上出现典型菌落，做血浆
凝固酶试验。
GB 4789.10-2010 MPN法